2003年,還在杭州藝術(shù)學校上學的葉祖新被選中出演《情斷上海灘》而進入演藝圈。2005年,參演古裝電視劇《李小環(huán)與苗翠花》,飾演方世玉；同年,參演古裝宮斗電視劇《大清后宮》,飾演少年道光帝。2006年參演家庭倫理電視劇《死去活來》,飾演樊濤；參演古裝歷史電視劇《皇上二大爺》,飾演趙金山。2008年,參演戰(zhàn)爭歷史電視劇《父親的戰(zhàn)爭》,飾演彭龍。步步驚心飾演胤?2009年,參演古裝歷史電視劇《楊貴妃秘史》,飾演韋堅；同年參演家族斗爭電視劇《大管家》,飾演李復修；參演戰(zhàn)爭歷史電視劇《內(nèi)線》,飾演蘇子童。2010年,參演古裝歷史電視劇《大唐女巡按》,飾演歐陽；參演古裝神話電視劇《活佛濟公2》,分飾必清,瘦仙童兩角；參演尋親電視劇《杜鵑的女兒》,飾演小吳。2011年,參演穿越電視劇《步步驚心》,飾演十阿哥胤誐；參演古裝搞笑電視劇《怪俠歐陽德》,飾演淳貝勒。2012年,參演愛情勵志電視劇《錯點鴛鴦》,飾演冷剛；參演傳奇抗戰(zhàn)題材電視劇《五臺山抗日傳奇之女尼排》,飾演任松良；參演古裝歷史電視劇《薛平貴與王寶釧》,飾演葉公公；參演戰(zhàn)爭歷史電視劇《向著勝利前進》,飾演何醫(yī)生；參演古裝武俠電視劇《新白發(fā)魔女傳》,飾演辛龍子；在古裝歷史傳奇電視劇《隋唐英雄》中飾演裴元慶。犀利仁師飾范大同2014年,參演古裝神話電視劇《歡天喜地俏冤家》,飾演高富帥；參演都市愛情電視劇《步步驚情》,飾演JACK；參演古裝搞笑愛情電視劇《犀利仁師》,飾演范大同；參演都市愛情電視劇《說好的幸?！?飾演許諾；參演古裝歷史傳奇電視劇《隋唐英雄4》,飾演薛丁山。2015年1月,參演《蜀山戰(zhàn)紀之劍俠傳奇》,飾演醫(yī)術(shù)不凡的張餡餅；8月參演的抗日電視劇《鐵在燒》在浙江,安徽衛(wèi)視播出,飾演走上歧路悲劇收場的丁丑娃；9月主演的愛情喜劇電影《窮途》上映,飾演前往苗寨尋找藥方的男主角鄒孝宇；參演都市情感電視劇《愛情萬萬歲》,飾演為愛癡狂的90后新新人類金波；11月參演莊園愛情電視劇《我們的秘密》,飾演為情所苦的造型師羅仁；11月與黃世超,楊世瀚,張思帆共同演唱的電視劇《蜀山戰(zhàn)紀》片尾曲《我就是我》單曲發(fā)布。12月主演民國動作懸疑電視劇《左眼詭事》,飾演左眼能看到鬼魂的男主角尹明涯。2016年,8月參演都市劇《一粒紅塵》,飾演癡情的酒吧老板閔朗。12月,主演的青春勵志偶像劇《食全食美》開機,飾演男主角打假衛(wèi)士吳佑。2017年3月31日,參演的懸疑電影《嫌疑人X的獻身》在中國大陸上映,飾演破案的線索人物羅淼警官。2018年9月17日,參演的現(xiàn)代劇《橙紅年代》播出,飾演正義青年貝小帥。2019年8月,參演電視劇《我們的西南聯(lián)大》,飾演青年學生葉潤名。2020年1月5日,與韓庚,王曉晨等人合作主演的都市情感劇《還沒愛夠》在江蘇衛(wèi)視播出；同年4月,參演的古代傳奇劇《清平樂》播出,他在劇中飾演內(nèi)侍總管張茂則。2021年,參演電影《1921》。2022年,參演電視劇《青春正好》播出。2023年4月23日,領銜主演的《戰(zhàn)火中的青春》在江蘇衛(wèi)視黃金檔播出,優(yōu)酷,愛奇藝雙平臺上線。9月15日,參演的電視劇《九義人》定檔播出。葉祖新寫真照葉祖新活動現(xiàn)場照葉祖新劇照

公益圖冊2013年3月,葉祖新參加家鄉(xiāng)衢州認領“微心愿”行動,幫助一些困難人員達成心愿。葉祖新囑托相關(guān)工作人員為衢州花園街道花園社區(qū)的4個困難家庭送上禮物,完成他們的心愿。2014年8月份,葉祖新參與由韓紅發(fā)起的“韓紅愛心-百人援青”大型公益醫(yī)療救助行動。2015年8月,葉祖新參加“韓紅愛心百人援貴”大型醫(yī)療援助公益行動,到貴州省羅甸縣邊陽鎮(zhèn)擔任志愿者。2021年7月,通過韓紅愛心慈善基金會向河南暴雨災區(qū)捐款。